обнаруженных. С помощью метода дифференциального центрифугирования из цельной СЖ выделяли клетки и фракцию цитозоля, которую использовали в дальнейшем для определения активности ферментов и уровня метаболитов (рис. 2).

1000 g, 10 мин.

0,1% тритон Х-100 12000 g, 15 мин.

Супернатант

25000 g, 30 мин.

Определение

активности СДГ

Рис. 2. Общая схема обработки СЖ

Определение активности Р-гиалуронидазы (КФ 3.2.1.35) проводили по методу [2, 7]. Определение гиалуроновой кислоты проводили по методу Грейлинга (Greiling, 1960) [17]. Определение содержания глюкуроновой кислоты поводили с нафторезорцином по методу Бюхнера [5]. Белок определяли по методу Лоури [1, 14].

Количественный анализ ПГ в СЖ осуществляли радиоиммунологическим методом с использованием набора реактивов и методических прописей фирмы «Clinical Assay» (США). Радиоактивность проб измеряли на жидкостном сцинтилляционном счетчике «Mark-5» фирмы «Nuclear Chicago» (США) в диоксановом сцинтилляторе. Расчет содержания ПГ производили в нг на 1 мл СЖ.

Скорость поглощения кислорода клетками СЖ определяли на полярографе ОН-102 (Венгрия).

Все пациенты получали монотерапию препаратом хондроитинсульфата «Структум» в суточной дозе 1500 мг (3 приема по 500 мг). Все параметры исследовались до начала приема препарата, через 3 месяца постоянного приема препарата и через 1 месяц после окончания

Примечание: здесь и далее значения представлены в формате M±m;

* - достоверность различий с контролем - p<0,05; n - количество испытуемых

Параллельно с этим возрастает концентрация глюкуроновой кислоты, являющейся конечным продуктом распада гиалуроновой кислоты, в среднем на 134%, или в 2,3 раза

При лечении препаратом «Структум» имеет место достоверное снижение как активности в-гиалуронидазы, так и концентрации глюкуроновой кислоты в среднем на 53% и 48% соответственно, что косвенно подтверждается зарегистрированным нами повышением содержания гиалуроновой кислоты в СЖ коленного сустава у больных ОА (рис. 3).

приема препарата. Сопутствующая терапия в течение всего времени исследования оставалась неизменной.

Математические расчеты и статистический анализ полученных экспериментальных материалов проводили по общепринятым статистическим алгоритмам. Рассчитывались выборочные параметры (выборочное среднее, среднее квадратическое отклонение, средняя ошибка выборочной средней). Для оценки достоверности различий применялись параметрические методы (критерий Стьюдента (t), критерий Вилкоксона-Манна-Уитни (U)) и непараметрические (критерий Уайта (К)). Оценка корреляции проводилась с помощью корреляционного анализа (коэффициент корреляции Vxy).

Результаты и обсуждение. В СЖ коленного сустава у больных ОА отмечается достоверное повышение активности в-гиалуронидазы в среднем на 287% (или в 3,9 раза) по сравнению с условной нормой (табл. 2)

Таблица 2

Активность бета-гиалуронидазы и содержание глюкуроновой кислоты в синовиальной жидкости коленного сустава человека при остеоартрозе и на фоне

лечения препаратом «Структум»

2,5

О

о

_

2

1,5 +

0,5 4-

{

IP

ш

\

\

1,6

1,4

1,2 1

0,8

0,6 0,4 0,2 0

X

x

о

X .0

I-

o о

X CO

ю

Норма (n=25) До лечения ХС 3 мес (n=30)(n=30)

1 мес после отмены

(n=30)

И%%Ш Глюкуронат —Ф— Гиалуронидаза Рис. 3. Динамика содержания глюкуроновои кислоты и активности бета-гиалуронидазы в СЖ при ОА на фоне терапии препаратом хондроитинсульфата "Структум"

Нами отмечено выраженное снижение концентрации гиалуроновой кислоты в СЖ коленного сустава больных ОА в среднем в 3,8 раза по сравнению с условной нормой (табл.

3).

Таблица 3

Содержание гиалуроновой кислоты в синовиальной жидкости коленного сустава человека при остеоартрозе и на фоне лечения препаратом «Структум»,

мг/100 мл

I_

1

0

Проведенные нами эксперименты показали, что под влиянием экзогенного ХС в форме препарата «Структум» имеет место достоверное повышение концентрации гиалуроновой кислоты уже через три месяца от начала терапии в среднем на 164%, или в 2,6 раза (рис. 4).